Pewarnaan BTA

PEWARNAAN BAKTERI TAHAN ASAM

A.    Tujuan

Untuk mengetahui cara kerja pengamatan bakteri tahan asam.

B.     Alat dan Reagensia

1.      Alat

a.       Mikroskop

b.      Beaker glass

c.       Lidi

d.      Batang besi

e.       Kompor

f.       Objek glass

g.      Ose

h.      Bunsen/lampu spiritus

i.        Korek api

j.        Kapas

k.      Batang besi

l.        Bak pengecatan

m.    Lap/tissue

n.      Masker

2.      Reagensia

a.       Oil imersi

b.      Larutan Zn A

c.       Larutan Zn B

d.      Larutan Zn C

e.       Alkohol

f.       Lisol

g.      Aquadest

 

C.    Cara Kerja

1.      Lap obyek glass yang akan digunakan, lalu panaskan di atas lampu spiritus hingga bersih dan tak ada uap yang menempel.

2.      Aduk sampel sputum menggunakan lidi kemudian ambil menggunakan lidi tersebut.

3.      Buat preparat dari sampel sputum tersebut di atas obyek glass berbentuk lingkaran dengan diameter ±2x3 cm. Kering anginkan preparat. Sisa lidi dimasukkan dalam larutan alcohol yang berisi lisol.

4.      Teteskan larutan Zn A pada preparat hingga seluruh permukaan tertutup.

5.      Letakkan objek glass di atas bak pengecatan, lalu diobori menggunakan batang besi yang telah dililit kapas dan diberi cairan spiritus hingga keluar uap. Atau dapat pula dengn cara meletakkan preparat di atas uap air panas.

6.      Dinginkan preparat 3-5 menit.

7.      Cuci di bawah air mengalir.

8.      Teteskan preparat dengan larutan Zn B selama 30 detik.

9.      Cuci di bawah air mengalir.

10.  Teteskan preparat dengan larutan Zn C selama 20-30 detik.

11.  Cuci di bawah air mengalir. Keringanginkan.

12.  Amati mikroorganisme di bawah mikroskop dengan perbesaran obyektif 100x.

13.  Lakukan pembacaan hasil menggunakan skala IUATLD atau skala Bronchus.

Skala IUATLD

a.       Tidak ditemukan BTA dalam 100 lapangan pandang      : -

b.      Ditemukan 1-9 BTA dalam 100 lapangan pandang         : ditulis jumlah BTA

c.       Ditemukan 10-99 BTA dalam 100 lapangan pandan       : +

d.      Ditemukan 1-10 BTA dalam 1 lapangan pandang           : ++

e.       Ditemukan >10 BTA dalam 1 lapangan pandang                       : +++

Skala Bronchus

a.         Tidak ditemukan BTA setelah pengamatan selama 15 menit      : -

b.        Ditemukan 40 BTA setelah pengamatan selama 15 menit           : +

c.         Ditemukan 20 BTA dalam 10 lapangan pandang                        : ++

d.        Ditemukan 60 BTA dalam 10 lapangan pandang                        : +++

D.    Hasil Pengamatan

Pada saat pengamatan, dapat dilihat BTA berbentuk batang berwarna merah. Bakteri ini akan dapat terlihat jika pengamat benar-benar fokus karena BTA yang terlihat agak samar-samar. Ada BTA yang bergerombol di satu titik dan ada juga yang menyebar.