Pewarnaan Spora

PEWARNAAN SPORA

A.   Tujuan

Untuk mengetahui cara kerja pengamatan mikroba dengan pewarnaan spora sehingga dapat ditemukan jenis-jenis mikroba dengan bentuk sporanya.

B.     Alat dan Reagensia

1.      Alat

a.       Mikroskop

b.      Beaker glass

c.       Batang pengaduk

d.      Kompor

e.       Objek glass

f.       Ose

g.      Bunsen/lampu spiritus

h.      Korek api

i.        Kapas

j.        Batang besi

k.      Bak pengecatan

l.        Lap/tissue

m.    Masker

2.      Reagensia

a.       Oil imersi

b.      Malchite green

c.       Safranin

d.      Tanah

e.       Aquadest

C.   Cara Kerja

1.      Lap obyek glass yang akan digunakan, lalu panaskan di atas lampu spiritus hingga bersih dan tak ada uap yang menempel.

2.      Buat preparat dari biakan mikroba yang berasal dari sampel tanah yang telah dimasak. Gunakan ose lalu lakukan fiksasi.

3.      Teteskan larutan Malachite Green pada preparat hingga seluruh permukaan tertutup.

4.      Letakkan objek glass di atas bak pengecatan, lalu diobori menggunakan batang besi yang telah dililit kapas dan diberi cairan spiritus hingga keluar uap. Jika bagian pinggir mulai mengering, tambahkan lagi dengan Malachite Green.

5.      Dinginkan preparat 10-15 menit.

6.      Cuci di bawah air mengalir.

7.      Teteskan preparat dengan Safranin selama 3 menit.

8.      Cuci di bawah air mengalir, dan dikering anginkan.

9.      Amati spora mikroorganisme di bawah mikroskop dengan perbesaran obyektif 100x.

D.   Hasil Pengamatan

Pada saat pengamatan, dapat dilihat bakteri berspora memiliki ciri-ciri berbentuk diplobasil dan streptobasil dengan spora berwarna hijau. Spora bakteri ada yang berada di bagian ujung (spora terminal) dan dibagian tengah (spora sentral dan spora oval).

E.   Kesimpulan

Dari percobaan yang telah dilakukan, dapat disimpulkan bahwa spora akan terbentuk jika bakteri berada dalam keadaan yang tidak memungkinkan untuknya, yaitu pada keadaan panas, kering, radiasi, dan adanya bahan kimia. Spora yang terbentuk ada bermacam-macam, yaitu spora terminal, spora subterminal, spora sentral, spora oval, dan ada juga spora yang membuat bagian sel bakteri mengembang. Larutan Malachite green akan mewarnai spora menjadi hijau dan bentuk bakteri beragam dengan warna merah dari Safranin.